对于简单的酶促反应　　E＋S＝＝ES → E＋P 双曲线方程可以写成： 　　Vmax[S]　　V＝——————（3.1）　　Km＋[S]　　这个方程称为Michaelis-Menten方程，是在假定存在一个稳态反应条件下推导出来的，其中 Km 值称为米氏常数，Vmax是酶被底物饱和时的反应速度，[S]为底物浓度。

由此可见Km值的物理意义为反应达到1/2Vmax的底物浓度，单位一般为mol/L，只由酶的性质决定，而与酶的浓度无关。

可用Km的值鉴别不同的酶。

当底物浓度非常大时，反应速度接近于一个恒定值。

在曲线的这个区域，酶几乎被底物饱和，反应相对于底物S是个零级反应。

就是说再增加底物对反应速度没有什么影响。

反应速度逐渐趋近的恒定值称为最大反应速度Vmax。

对于给定酶量的Vmax可以定义为处于饱和底物浓度的起始反应速度n。

对于反应曲线的这个假一级反应区的速度方程可写成一种等价形式：　　n（饱和时）＝Vmax＝k[E][S]0＝k[E]total＝k cat[ES] （3.2）　　速度常数k等于催化常数k cat，k cat是ES转化为游离的E和产物的速度常数。

饱和时，所有的E都是以ES存在。

方程（3.2）中还有另一个简单的关系式：Vmax＝k cat [E]total。

从中得出：k cat＝Vmax / [E]total。

k cat的单位是s－1。

催化常数可以衡量一个酶促反应的快慢。

　　米氏常数Km是酶促反应速度n为最大酶促反应速度值一半时的底物浓度。

这可通过用[S]取代米氏方程（3.1）中的Km证明，通过计算可得n＝Vmax /2。

　　双倒数作图 　　酶促反应中的Km和Vmax值有几种测量方法。

固定反应中的酶浓度，然后分析几种不同底物浓度下的起始速度，就可获得Km和Vmax值。

但直接从起始速度对底物浓度的图中确定Km或Vmax值是很困难的，因为曲线接近Vmax时是个渐进过程。

所以通常都是利用米氏方程的转换形式求出Km和Vmax值。

常用的米氏方程转换形式是Lineweaver-Burk方程，也称为双倒数方程。

　　1 Km 1　1　　——＝ ———·——＋———（3.9）　　n Vmax [S] Vmax　　使1/ v 对1/[S]作图，可以获得一条直线（如左图）。

从直线与x轴的截距可以得到1/Km的绝对值；而1/Vmax是直线与y轴的截距。

双倒数作图直观、容易理解，为酶抑制研究提供了易于识别的图形。